创新难，难创新，首先就是要找到创新的点，才能想实现创新的途径和方法。我觉得可以从如何几个方面：
1。科研扫盲，这是创新的第一步也是必要的一步。
首先是把导师，师兄，师姐的文章和论文，科学基金的申请成功报告，没中的申请报告，结题报告，横向课题的报告，咨询报告等全部浏览一遍，知道自己在什么领域，这个领域你的导师和前几届做什么，这个对于硕士来说，我觉得很有必要。这相当于给你科研扫盲，对于那些博士跨学科的来说，也是很有必要的。

2。寻找问题和分解问题，创新的源头。
如连问题都找不到或不知道如何分解问题，科研的基本功需要加强和科研思考的方式需要转换。 多参加知名专家或者基金委或者部委的讲座。这个可以听到很多现实问题的描述，不一定是怎么解决，可能是抛出了问题。问题导向，往往就是我们研究的出发点。还有有的虫子可以走捷径，就是关注当年国家基金（自然、社科、863，973等）申请指南和已经中标的基金项目，这些都有网站，上面都有每年中标项目和项目列表统计，多去看看。如果2007年，有个基金项目你正好赶兴趣，这时你正好处于选题时候，就可以选他，等那个基金结题了，你的博士论文也差不多了。尽管处于两个地方，但是肯定结果不一样。还有就是多观察和对经常见的问题问个为什么？不要相信任何权威，敢于对一切质疑。导师不一定是对的。许多重大创新都是建立对权威的挑战，这样的例子数不胜数。在我硕士是做实验的，我举个简单例子，农村的小孩大概都知道田边的稻子长得好，谷子饱满，我想大多数都知道阳光充足呀，肥料好呀，根系可以深入田埂吸收营养。但是估计有的农村出身的同学可能还注意到一个现象，就是长在田埂护边上的稻谷更好，这是为什么呢，平时护边上的稻子并没有被水淹没，所以这就一个问题。仅研究这个问题或现象，我原来的老板的团队就做了863，973项目，其实就是一个适度亏缺的问题。这个问题如果延伸到医学，你看那些得胃病的人，往往是饱一顿饿一顿，或者经常吃的很饱（据说经常吃的很饱容易变傻），其实如果我们让得胃病的人吃饭的时候“适度亏缺”不就容易了吗？接下来的问题就是：那么为什么适度亏缺就可以了？我们可以发明什么药物让这个人吃了这个药胃还没吃饱情况下就产生饱意或者适度亏缺呢？所以，问题就是要平时多观察一些细致的问题或者已经发生的问题，我们往往对我们习以为常的问题，不问为什么，建议大家看看每年搞笑诺贝尔奖的情况。比如现在学管理，管理的问题就多了，举个简单身边例子，读博士的时候，发觉大家相互交流很少，有的人不愿意把自己的想法说出来，所以，许多老板开什么周会月会，但是往往是气氛不热烈，老板说得多，那么为什么这样呢？你如果深究下去，会有很多值得研究的问题。问题不是没有，而是你没有观察，或者没有对经常的问题，问个为什么？ 分解问题，我想学管理的大概知道WBS（工作分解结构），这个对于其他学科虫子来说，真的很有帮助，可以去google，百度搜索下。各个学科不一样，看了这个工具，大家结合自己学科捉摸吧。没有共同的经验，就是工具一样。最后提醒一下，在工作分解结构之前或者看问题之前，一定要高处着眼，低处着手。高处，就是你头脑里要想着你这个问题所有有关联的各个方面，而低处就是从叶子着手解决。

3。看文献——获取创新灵感或者解决问题方法的路径依赖。
看文献，不是看书。这个很多虫子也贡献了很多经验。但是我周围的人也知道小木虫，但是很多人看了那么多经验，可是看完了还是很困惑？原因何在呢？我观察了很周边的同学和同事，我发觉一个重要的就是动手太少，看纸质期刊太少。这个我想小木虫很多发SCI的，一般看国外期刊，但是现在很多图书馆的国外期刊也有纸质版本，看纸质版本，你可以浏览到你的这个领域顶级期刊相关的研究，一些人为什么没有找不到创新，有可能就是根本不知道自己研究的领域到底有那些方向。，随便浏览纸质版本，或许一个并不相关的问题，你无意中看到了，给了你启发，电脑搜索的电子文献往往我们是按主题或者关键词搜索的，请问，你能保证你提前设置的关键词是最新的吗？创新要看不同主题的文章，很多来源于交叉和其他学科。当然有的学科即使要创新也要需要实验设备支撑，这个也是不断磨合的过程。要想找到自己创新点，我觉得看文献很重要。如何看呢？首先，准备好一个不大不小的笔记本（可以命名为科研灵感本），最好有个厚重封皮，准备一支笔。摔开电脑，周边的同学许多很依赖电脑，存了很多文献，至于看了没有，估计大多数占空间。还有电脑一看，网络一开，你得思维无法完全集中于文献，一会儿QQ，一会儿小木虫论坛等等，打扰太多。灵感=心静+环境。去图书馆期刊阅览室，带着前面1，2想到的问题和听到的问题（也要记在你那个专门的科研灵感本上），静下心来，加起来的时间至少2个月，边看期刊的时候，如果闪现什么灵感，马上记下来，切记，一定要记下来，好记忆不如烂笔头，注明出处，你的灵感是解决什么问题的，这个文献给你的启示到底是什么，如果你当时沿着这个灵感还有其他想法，就沿着这个思路下去，直到你不知道写什么，那么就停止，看第二篇。看期刊，最好是从目录看起，稍微沾边的都要浏览一下。对于做实验的科研来说，一般期刊比较少，也比较专业，所以很快能看完。但是对于社科，比如，管理，经济，法学等学科来说，往往会涉及到很多期刊，所以时间很长，但是一定要静下心来，这个时间可以在一年级上完课就去读。对于社科的来说，往往创新不容易，我这里特别提醒一下，由于我原来学工科的，现在学管理，我觉得社科类的研究生一定要去浏览下工科类的杂志或者理科类的杂志或者交叉学科的杂志，一般会有大收获。我的几篇小论文都是启发来源于工科。另外，社科研究的问题往往是一个系统的问题。所以，只要是系统问题，工科类的控制类杂志（像控制与决策，电气自动化，机械工程等），系统类杂志（系统工程理论与实践，运筹学等），计算机类的杂志（计算机学报，计算机技术与应用，微型计算机系统等）都要看。即使就是工科的也可以去看，比如有点人研究水资源配置，显然就是一个系统问题。这些杂志很有帮助。

4．利用网络——创新帮助的好助手。
网络当然有很多专业论坛，数据库等，我都将其归类为电子文献。 如何看电子文献。首先得按主题分类，很多虫子都贡献了，这里不说了。按照上3，这样你从纸质期刊得到很多灵感，那么现在你把你的这些灵感关键词或者主题，从电子文献中去索取，也要按照3的办法，看的时候，马上记下来，或者建立一个WORD文档或者专门的软件，把感兴趣的截取下来，并在旁边注明给你得启发是什么，它有什么用处？这个很重要，有的人看了文献，就丢在一边，看得多，丢得多。另外，在看电子文献的时候，一定要关掉QQ和论坛等东西，不要让这些断了你灵感的来路。

5．积累——创新的技巧和关键手段。
按3，4步骤，这样你就积累了很多灵感了。厚厚一个本子或者一个长篇word文件，这样重温一遍。请记住，没有积累，是没有创新的！！！！这个积累不是说把文献从数据库下载下来，放在计算就里面，而是你看了文献，你的随时闪光点或灵感的用笔记下来的看得见的积累。这样，你把你这些闪光点，找了相关文献，觉得可以写一篇小论文，就马上动手写，不要拖，不要找借口，要知道写作的激情会失去的，找不回来的。把小论文写好了，放在一段时间，再看，可以的话，修改后就投，如果觉得可以，投高一些杂志，觉得一般，投一般核心，觉得实在不咋样，就投哪些不是核心的。这里，我周围一些同学和同事，有个观念就是要发就发好的，我觉得这个不好，即使是一篇非核心的，看到自己的东西变成铅字了，心里还是会高兴的，这会给你极大的精神动力。如果，你的稿子就是要发SCI，EI，SSCI等，发了一年半载都难中，会打消你得积极性和使你苦闷，而一旦苦闷了，灵感就跑了。灵感是非常偏向哪些思想活跃的人，那些有精神的人。还有要注意，大的创新点是要靠小的创新点集成的。没有小的，那有大的。胜利的目标总是在不断的加油中接近的，小论文就算你的油，写写，你就顺了，这点对于社科类的虫子，估计很重要。

6．走向大自然——获取一颗创新的生态心。
现在其实我们很多解决的问题来源大自然，大自然是生命的来源，也是创新的生命起源。不管你是理论研究还是社会研究，保持一个生态心很重要，过于功利，浮躁，布满灰尘的心都是创新的杀手。走向大自然，不要逛什么街和超市。这点，估计有的人会说，这与找创新点有何关系？登高而望远，试问，你在那么喧闹的超市，那么多帅哥美女从你前面经过，你的神经会得到休息吗？你的思维会有闪光吗？所以，如果在实验室或者宿舍呆烦了，不知道怎么做。不如带上自己科研灵感本和笔，去郊外或者爬山，让自己的心胸开阔起来，说不定心中的苦闷气出去了，灵感就进来了。

总结：注意看交叉学科和其他学科的杂志，多记，心静，多动手，贴近大自然。
我的心得：没有不开窍的脑袋，只是方法不对。不是没有创新，而是积累不够。

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科研工作时应该培养的习惯:

１：磨练召唤成功的力量,培养想要成功的动力;

２：珍惜生命，珍惜时间,多有点成本意识;

３：碰到卡壳时,静下心,换个角度,再多想一想，总能找到解决方案;

４：有积极心态者处处都能发觉理想的结果;

５：懂得自救,条件好时,要努力;条件不好时,更要努力;

６：善于放弃，善于从损失中看到价值;

７：打开失败旁边的窗户，也许你就看到了希望或得到你想要的结果;

８：不要怕耗时间，不要悔自己的选择;

９：不要和自己较劲，让证据说话更有效果;

１０：记住你跑得快，别人跑得更快;要想做的漂亮点,就每天多做一点点.

1．立足于创新：新概念、新方法（技术）、新资料、新发现、新理论。“新”是一篇好论文的灵魂。论文写作前，找到发表点，必须做到自己能够说服自己，这篇文章是值的去发表的，哪怕闪光点不是很突出，通过多看文献、多分析试验数据，找到可以让同行感兴趣的闪光点：新方法、新规律、新认识。

2.导师的选取很重要，导师水平的高低，要求不同，对你的影响都会很大。

3.要坚持，科研无捷径。只要你慢慢的发现学科的兴趣。即便做不出来，也感到这个有意思，有价值，那就超出科研的其他物质的东西了。

4.自己读了大量的文献(这个是必需的，熟练自己的大脑，锻炼自己的思维，增长自己的见识很有好处)。当然这涉及文献的范围问题，不能跨度太大，最好先在某一个比较小的领域，由点到面。毕竟当初自己的思想也好，基础也好还不具大家水平。
5．立足于我国特有的自然条件（如黄土高原、黄河、青藏高原、西南喀斯特地貌），发现新现象，提出新概念。

6.认真写作，尽量完美的提交初稿，让编辑和审稿人能够知道你是在做一个严谨的研究。写作三份之一的时间，修改三份之一的时间，投稿三份之一的时间。

7.认真修改语言，建议一定自己突破，不能每篇论文都请别人去修改，多看，并参考他人的语言经验.发给国外同行再修饰润色，这样减少了中国式英语，避免了投稿后审稿者无法理解你的文章内容

8.关于语态，要尽可能使用被动态。比如要这样写：This study wascarried out to investigate the complications of thyroid arterial embolization.这种被动态论文中常见，而如果写成“We carried out thisstudy to investigate the complications of thyroid arterial embolization",这种主动态无论从语法上还是其他方面来说都正确，但就是不适用于科学论文中。因为科学论文讲究的是科学性，往往从客观的角度去描述。

9.文章中的字体，表格的标准化很重要，审稿者和投稿编辑是不会给你花时间改这些东西的，他一个E-Mail说那里不行你就得改.

10. endnote对文献的编辑，这看你准备发到那个杂志，参考一下他们的格式编辑就行

11.一切准备好之后，发给国外同行审阅，顺便问一下发那些杂志较好，这可能是量体裁衣吧，不要盲目投稿，提高投稿命中率
12．写好前言，特别是写好文献综述；
13.资料来源和观测方法要准确详细地交待清楚；
14．凡是引用他人的观点、事实、数据，均须注明出处；前言主要是简单地交代一下该研究的过去历史、现状以及存在的问题，这一部分以1-3段为宜，不能太长。常见的问题是写得太短或太长。
15．要附上研究区的地图，文中提到的地名要出现在图上，不能遗漏；
16．寄回修改稿时，对审稿人所提的意见是如何修改的，要一一说明；当时审稿人要求补充必要数据，但当时国内实验室条件不能没有该设备，虽然该设备在国外非常普遍，经过沟通，可以通过。
17．敢于向权威刊物投稿:不少杂志欢迎来自中国的成果；国外审稿人的意见颇多真知灼见，即使退稿，对你也有很大启发；档次越高的刊物，审稿人的水平越高，有新意的成果越不会被埋没；可以不花代价得到与世界级学者进行学术对话的难得机会
18.大胆向SCI刊物投稿，不要怕退稿。国际SCI刊物一般不迷信名人。
19.一次被拒并不能说明你论文一点价值就没有，只是因为各个杂志的发表要求不同，对论文的创新、写作、格式等等的要求不同，你可以选择投往其他杂志。
20.很多杂志都很烂、不重要、没有影响力，但都是SCI收录杂志。你如果投稿多了，也会发现一些很好投稿、很容易被接受的杂志.十篇差文章，不如一篇好文章。

Beginning
   1. In this paper, we focus on the need for
   2. This paper proceeds as follow.
   3. The structure of the paper is as follows.
   4. In this paper, we shall first briefly introduce fuzzy sets and related concepts
   5. To begin with we will provide a brief background on the

   Introduction
   1. This will be followed by a description of the fuzzy nature of the problem and a detailed presentation of how the required membership functions are defined.
   2. Details on xx and xx are discussed in later sections.
   3. In the next section, after a statement of the basic problem, various situations involving possibility knowledge are investigated: first, an entirely possibility model is proposed; then the cases of a fuzzy service time with stochastic arrivals and non fuzzy service rule is studied; lastly, fuzzy service rule are considered.

   Review
   1. This review is followed by an introduction.
   2. A brief summary of some of the relevant concepts in xxx and xxx is presented in Section 2.
   3. In the next section, a brief review of the .... is given.
   4. In the next section, a short review of ... is given with special regard to ...
   5. Section 2 reviews relevant research related to xx.
   6. Section 1.1 briefly surveys the motivation for a methodology of action, while 1.2 looks at the difficulties posed by the complexity of systems and outlines the need for development of possibility methods.

   Body
   1. Section 1 defines the notion of robustness, and argues for its importance.
   2. Section 1 devoted to the basic aspects of the FLC decision making logic.
   3. Section 2 gives the background of the problem which includes xxx
   4. Section 2 discusses some problems with and approaches to, natural language understanding.
   5. Section 2 explains how flexibility which often ... can be expressed in terms of fuzzy time window
   6. Section 3 discusses the aspects of fuzzy set theory that are used in the ...
   7. Section 3 describes the system itself in a general way, including the ….. and also discusses how to evaluate system performance.
   8. Section 3 describes a new measure of xx.
   9. Section 3 demonstrates the use of fuzzy possibility theory in the analysis of xx.
   10. Section 3 is a fine description of fuzzy formulation of human decision.
   11. Section 3, is developed to the modeling and processing of fuzzy decision rules
   12. The main idea of the FLC is described in Section 3 while Section 4 describes the xx strategies.
   13. Section 3 and 4 show experimental studies for verifying the proposed model.
   14. Section 4 discusses a previous fuzzy set based approach to cost variance investigation.
   15. Section 4 gives a specific example of xxx.
   16. Section 4 is the experimental study to make a fuzzy model of memory process.
   17. Section 4 contains a discussion of the implication of the results of Section 2 and 3.
   18. Section 4 applies this fuzzy measure to the analysis of xx and illustrate its use on experimental data.
   19. Section 5 presents the primary results of the paper: a fuzzy set model ..
   20. Section 5 contains some conclusions plus some ideas for further work.
   21. Section 6 illustrates the model with an example.
   22. Various ways of justification and the reasons for their choice are discussed very briefly in Section 2.
   23. In Section 2 are presented the block diagram expression of a whole model of human DM system
   24. In Section 2 we shall list a collection of basic assumptions which a ... scheme must satisfy.
   25. In Section 2 of this paper, we present representation and uniqueness theorems for the fundamental measurement of fuzziness when the domain of discourse is order dense.
   26. In Section 3, we describe the preliminary results of an empirical study currently in progress to verify the measurement model and to construct membership functions.
   27. In Section 5 is analyzed the inference process through the two kinds of inference experiments...
This Section
   1. In this section, the characteristics and environment under which MRP is designed are described.
   2. We will provide in this section basic terminologies and notations which are necessary for the understanding of subsequent results.Next Section
   2. The next section describes the mathematics that goes into the computer implementation of such fuzzy logic statements.
   3. However, it is cumbersome for this purpose and in practical applications the formulae were rearranged and simplified as discussed in the next section.
   4. The three components will be described in the next two section, and an example of xx analysis of a computer information system will then illustrate their use.
   5. We can interpret the results of Experiments I and II as in the following sections.
   6. The next section summarizes the method in a from that is useful for arguments based on xx

   Summary
   1. This paper concludes with a discussion of future research consideration in section 5.
   2. Section 5 summarizes the results of this investigation.
   3. Section 5 gives the conclusions and future directions of research.
   4. Section 7 provides a summary and a discussion of some extensions of the paper.
   5. Finally, conclusions and future work are summarized
   6. The basic questions posed above are then discussed and conclusions are drawn.
   7. Section 7 is the conclusion of the paper.

   Chapter 0. Abstract
   1. A basic problem in the design of xx is presented by the choice of a xx rate for the measurement of experimental variables.
   2. This paper examines a new measure of xx in xx based on fuzzy mathematics which overcomes the difficulties found in other xx measures.
   3. This paper describes a system for the analysis of the xx.
   4. The method involves the construction of xx from fuzzy relations.
   5. The procedure is useful in analyzing how groups reach a decision.
   6. The technique used is to employ a newly developed and versatile xx algorithm.
   7. The usefulness of xx is also considered.
   8. A brief methodology used in xx is discussed.
   9. The analysis is useful in xx and xx problem.
   10. A model is developed for a xx analysis using fuzzy matrices.
   11. Algorithms to combine these estimates and produce a xx are presented and justified.
   12. The use of the method is discussed and an example is given.
   13. Results of an experimental applications of this xx analysis procedure are given to illustrate the proposed technique.
   14. This paper analyses problems in
   15. This paper outlines the functions carried out by ...
   16. This paper includes an illustration of the ...
   17. This paper provides an overview and information useful for approaching
   18. Emphasis is placed on the construction of a criterion function by which the xx in achieving a hierarchical system of objectives are evaluated.
   19. The main emphasis is placed on the problem of xx
   20. Our proposed model is verified through experimental study.
   21. The experimental results reveal interesting examples of fuzzy phases of: xx, xx
   22. The compatibility of a project in terms of cost, and xx are likewise represented by linguistic variables.
   23. A didactic example is included to illustrate the computational procedure

   Chapter 1. Introduction
   Time
   1. Over the course of the past 30 years, .. has emerged form intuitive
   2. Technological revolutions have recently hit the industrial world
   3. The advent of ... systems for has had a significant impact on the
   4. The development of ... is explored
   5. During the past decade, the theory of fuzzy sets has developed in a variety of directions
   6.The concept of xx was investigated quite intensively in recent years
   7. There has been a turning point in ... methodology in accordance with the advent of ...
   8. A major concern in ... today is to continue to improve...
   9. A xx is a latecomer in the part representation arena.
   10. At the time of this writing, there is still no standard way of xx
   11. Although a lot of effort is being spent on improving these weaknesses, the efficient and effective method has yet to be developed.
   12. The pioneer work can be traced to xx .
   13. To date, none of the methods developed is perfect and all are far from ready to be used in commercial systems.

   Objective / Goal / Purpose
   1. The purpose of the inference engine can be outlined as follows:
   2. The ultimate goal of the xx system is to allow the non experts to utilize the existing knowledge in the area of manual handling of loads, and to provide intelligent, computer aided instruction for xxx.
   3. The paper concerns the development of a xx
   4. The scope of this research lies in
   5. The main theme of the paper is the application of rule based decision making.
   6. These objectives are to be met with such thoroughness and confidence as to permit ...
   7. The objectives of the ... operations study are as follows:
   8. The primary purpose/consideration/objective of
   9. The ultimate goal of this concept is to provide
   10. The main objective of such a ... system is to
   11. The aim of this paper is to provide methods to construct such probability distribution.
   12. In order to achieve these objectives, an xx must meet the following requirements:
   13. In order to take advantage of their similarity
   14. more research is still required before final goal of ... can be completed
   15. In this trial, the objective is to generate...
   16. for the sake of concentrating on ... research issues
   17. A major goal of this report is to extend the utilization of a recently developed procedure for the xx.
   18. For an illustrative purpose, four well known OR problems are studied in presence of fuzzy data: xx.
   19. A major thrust of the paper is to discuss approaches and strategies for structuring ..methods
   20. This illustration points out the need to specify
   21. The ultimate goal is both descriptive and prescriptive.
   22. Chapter 2. Literature Review
   23. A wealth of information is to be found in the statistics literature, for example, regarding xx
   24. A considerable amount of research has been done .. during the last decade
   25. A great number of studies report on the treatment of uncertainties associated with xx.
   26. There is considerable amount of literature on planning
   27. However, these studies do not provide much attention to uncertainty in xx.
   28. Since then, the subject has been extensively explored and it is still under investigation as well in
   methodological aspects as in concrete applications.
   29. Many research studies have been carried out on this topic.
   30. Problem of xx draws recently more and more attention of system analysis.
   31. Attempts to resolve this dilemma have resulted in the development of
   32. Many complex processes unfortunately, do not yield to this design procedure and have, therefore, not yet been automated.
   33. Most of the methods developed so far are deterministic and /or probabilistic in nature.
   34. The central issue in all these studies is to
   35. The problem of xx has been studied by other investigators, however, these studies have been based upon classical statistical approaches.
   36. Applied ... techniques to
   37. Characterized the ... system as
   38. Developed an algorithm to
   39. Developed a system called ... which
   40. Uses an iterative algorithm to deduce
   41. Emphasized the need to
   42. Identifies six key issues surrounding high technology
   43. A comprehensive study of the... has been undertaken
   44. Much work has been reported recently in these filed
   45. Proposed/Presented/State that/Described/Illustrated/
   Indicated/Has shown / showed/Address/Highlights
   46. Point out that the problem of
   47. A study on ...was done / developed by
   48. Previous work, such as  and , deal only with
   49. The approach taken by  is
   50. The system developed by  consists
   51. A paper relevant to this research was published by
   52. 's model requires consideration of...
   53. ' model draws attention to evolution in human development
   54. 's model focuses on...
   55. Little research has been conducted in applying ... to
   56. The published information that is relevant to this research...
   57. This study further shows that
   58. Their work is based on the principle of
   59. More history of ... can be found in xx et al. .
   60. Studies have been completed to established
   61. The ...studies indicated that
   62. Though application of xx in the filed of xx has proliferated in recent years, effort in analyzing xx, especially xx, is lacking.
   Problem / Issue / Question
   63. Unfortunately, real-world engineering problems such as manufacturing planning do not fit well with this narrowly defined model. They tend to span broad activities and require consideration of multiple aspects.
   64. Remedy / solve / alleviate these problems
   67. ... is a difficult problem, yet to be adequately resolved
   68. Two major problems have yet to be addressed
   69. An unanswered question
   70. This problem in essence involves using x to obtain a solution.
   71. An additional research issue to be tackled is ....
   72. Some important issues in developing a ... system are discussed
   73. The three prime issues can be summarized:
   74. The situation leads to the problem of how to determine the ...
   75. There have been many attempts to
   76. It is expected to be serious barrier to
   77. It offers a simple solution in a limited domain for a complex

平时在实验室最常听到的一句话就是“今天某某试验没做好是为什么？今天某某试验没出结果是什么原因？今天某某试验为什么会是这样的呢？” 等等。然后仔细一查找原因，往往是由于操作上面的不认真，或是一些小小的细节没有注意到。以下是集各路朋友的一些经验，与大家分享：
1跑page胶的时候，小电压跑会避免高电压产生的热量尔导致的胶层变形。低电压泳道会比大电压泳道跑的直一些，且分离效果更高，有利于分子量相差不大的蛋白分离。
2. 提取质粒的时候，最后一步的酒精挥发很关键，基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一点时间，最好是空调吹热风，或是37度温箱放长一点的时间，我试过室温过夜，酶切很好。
3. 做WESTERN BLOT 的时候，大家往往会摸索一抗、二抗的浓度，封闭时间，曝光时间等等，而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜，甚至重新提蛋白，这样会浪费大量的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后，将PVDF膜晾干，裁减成小块，保存起来，用的时候取出一块，没有任何影响。这对于摸索条件的战友来说，节约了大量的时间。
4. 有关缓冲液和培养基配置
1）将缓冲液配方中的成分分别以10－100倍配成母液储存，需要的时候只需将相应的母液混合，补加水稀释即可
2）配培养基时通常会忘记各成分的量，如配LB时的三个成分不记得到底哪个是5g，哪个要10个，因此可以在常用的试剂瓶的标签上注明所需的量，如配LB时，在NaCl瓶外注明10g/L, yeast 5 g/L, tryton 10 g/L等，很方便，不需要每次配之前临时翻书
5. 有关PCR主反应液配置:
在做克隆鉴定的时候经常需要在酶切鉴定前进行PCR鉴定，每次配置PCR反应液很繁琐，可以将其配置类似kit的形式，按你需要的反应体系列表，然后放大100倍配置100×主反应液（100次反应），其中含buffer，Mg2＋，dNTPs，但不含引物和Taq酶，然后可以10×分装或一管储存在－20度，在需要的时候拿出融开，然后按所需的PCR反应个数吸取相应的倍数，再补加相应反应倍数的Taq和引物，混匀后分装，这样做的好处如下：
1）可极大的节省宝贵的时间，可早点收工，看球
2）避免每次反应加样不均的可能
3）大大减少PCR假阳性的产生
6. 有关酶切反应液的配置:
在做酶切时，也可以象PCR一样配置主反应液，每次反应前先列好反应的体系，算好需要的反应数，然后按所需反应的体系按所需反应数放大，加入buffer、酶、水，质粒栏空缺，然后混合后按除质粒DNA的体积分装，然后再在每管中加入相应体积的质粒DNA酶切，这样做的好处如下，特别是当同时有10几个阳性克隆需要鉴定时尤为明显：
1）各反应成分均一
2）可大大减少限制型内切酶的使用
3）节省时间
7. 有关SDS－PAGE：
1）可将SDS－PAGE的积层胶，分离胶预先配好大体积如100ml储存在4度冰箱（注：10％AP，TEMED不加，切记！！！），每次配置时只需吸取相应体积的预制胶加入AP，TEMED即可，没必要每次制胶时候翻分子克隆，特别方便，而且，这样的预制胶可储存半年以上，不失为偷懒的绝佳方法；更关键的是可大大减少与丙稀酰胺的接触，因此大大减少中毒的机会。
2）电泳时虽然小电泳分离效果要好一些，但2小时以上的等待的时间实在是痛苦，因此可以提高电泳至150V，但需要将整个电泳槽放在放满冰水的脸盆里散热，这样跑出来的胶分离效果丝毫不比低电压来的差，关键是时间大大节省，不需1h即可看结果了
8. 实验中小窍门我想能够分成两类：一类是“非常规”操作；一类是常规操作过程中一些省时省事手段。
前一类，我举个例子：有时候第一天涂的转化平板、次日早晨转化子可能长成的菌落比较大（1~2毫米以上，BL21就长得快），下一步转化子做质粒鉴定。这个情况下可以直接挑取一块菌苔（勿带出培养基），50微升酚/氯仿悬浮菌体，放置两分钟，加40微升TE抽提，上层TE吸出后再氯仿抽提一次，吸取上层TE即是质粒提取液。提取的质粒可以直接用于电泳和酶切。这样操作，可以省去转接液体试管的培养步骤，至少节省6~8小时的时间。但是，要在各步骤都控制得很好的情况下才能保证提取和酶切的效果，不同的实验室或者操作者未必能够很方便地重复----其实，其它的一些“小窍门”也是如此。
后一类的小窍门则在实验室中无处不在。如：平行作不同样本的PCR,模板DNA加量一样，配置PCR体系可以一起配制后分装----这点做过试验的都知道，但是配制的时候配制量可以比预期分装量稍多一点（如用100微升则配110微升），这样可以避免有时候分装不够的尴尬，因为不同特别是大小不同的枪，会有误差。再比如：楼上有站友说的sds-page胶预配（APS和TEMED、或者后者先不加）的问题，实际上时间放置过长肯定影响效果，如果要在一天内连续地跑两次板，何尝不可？又比如，配sds-page胶的时候，上层胶和下层胶可以只用一个大枪头：先取胶，次取水，取6.8的tris后再取8.8的tris，省时省料。
20021108站友开的这个帖子很好，在上上层楼的帖子说得也有道理。但我想，“窍门”和“偷懒”不应该是因果关系。其实，不管是那一类的小窍门，都是在充分地理解实验各步骤的原理、经过多次试验积累、再加上一点点思索然后尝试的结果。知其然知其所以然和勤于思考敢于探索，是根本。否则，别人的小窍门对你也未必能够有用。才进实验室的新手，务必要先练好规范扎实的操作，然后才能弄“窍门”。本末倒置，贻害无穷。
9. 我一直是把SDS－PAGE的积层胶，分离胶预先配成mixture，APS制胶时加入，半年内使用，绝对没有问题，我保证。
10. 做SDS-PAGE的时候，除了蛋白量上样一致，最好体积也一致，这样跑出来的胶各个泳道之间的band能做到一样宽，方便后面的比较，特别是WB。做法就是拿1X的上样缓冲补全要加的样做到体积一致，否则跑出来会有的宽有的窄，特别是上样体积相差较大的。
11. 在把蛋白胶做成干胶时，很多时候会因为有气泡使胶裂掉，我的经验是在做胶时加上层膜前在胶上多加些水就不容易进气泡了，还有就是高温烘胶，我喜欢放到60度烘箱里烘，这样水分蒸发速度快，即使有一些小的气泡也不会有影响，呵呵，这是经验之谈，我从来都没失手过，大家可以试试
12. 做大肠表达时确定蛋白是否表达一般要煮样做诱前诱后检测,但很多时候煮出来的很黏影响跑胶效果.我发现如果现用8M Urea重悬细菌再煮效果会有极大改善.
注:不能用Gu-HCl代替
13. 我也推荐几个偷懒的方法
1 做SDS-PAGE跑胶通常都是现配现用,但配胶要>1h,所以如果想第二天睡个懒觉而又不耽误跑胶可以于前一天晚上做好浓缩胶和分离胶,待凝聚后不要拔下梳子,把含胶玻璃板从制胶槽取下,用保鲜膜包上,注意玻璃板上下两边缘会有气体,所以需要加一点电泳缓冲液以避免胶内水分蒸发.然后放4度过夜.第二天直接拔下梳子行后续.国外好多公司出售脚既是如此,可以保存上星期.
2 配置分离胶或者非变性胶时因胶凝时收缩可导致加样孔变浅.可以将加剩的胶放入4度以降低凝聚速度,而将凝胶放入37度促聚,并随时用4度加剩的胶补充下降的胶面.另外将胶横放与水平面成~10度角也可以减少收缩的影响.
3 推荐一个节约抗体/时间的做法:
同时跑2块胶,同时转膜,然后两块膜背靠背放入同一封口膜同时封闭,同时一抗二抗(最好是用转轮,这样效果好.如果是摇床,隔一段时间帮它们翻个身以保证两张膜的正面都有机会与液体充分接触.一起洗膜(可以稍微加强洗膜也可以不做.我最多一张盘子里放4张膜而没有影响洗膜).可分别或同时压片.这样就可以节约一半抗体和接近一半时间而不会影响结果.
或者另外一个就是孵育后的抗体不要扔,好的抗体可以反复做好几张膜呢.但每次都会减弱,效果不如上面一种方法.
14.做western blotting 转膜时，胶放在转膜缓冲液中一段时间，待胶在含有甲醇的缓冲夜中缩小的差不多后装好转膜装置，我的经验是把膜印在胶上直接在膜上画出预染maker条带，方便的很。因为很多时候跑电泳时胶上的预染maker很清楚，等转膜后就不是分辨的很清楚了。不过要注意画好预染maker后就不要使胶和膜发生对位移动了，以防maker失去参照价值。
15. 超滤最合适用于蛋白的浓缩，更换缓冲液和除盐，对于按照分子量进行初分离的效果不是很好，理论和现实是有很大差别的^_^
16. 关于Western Blot
1）器具的清洁非常重要，开始做前，为了安全，尤其是装胶的厚薄玻璃板，可以先用中性洗涤剂和自来水反复冲洗，确保无洗涤残液后用蒸馏水冲洗2－3遍，然后用去离子水冲洗一遍。最后用95％酒精再擦一遍后晾干备用。
2）配胶最好现用现配，先配下层胶（分离胶），后配上层胶（浓缩胶或积层胶），而且在临灌胶前加APS并迅速混匀，即用移液枪抽吸与注入1－2次即可。
17跑蛋白page的时候，一开始用加样针，太麻烦，发现用20ul枪+普通小白枪头点，非常省事。另外，点样时有可能看不清孔在哪，看远离你的那面胶，孔有反光的。点样也点你对面的那块胶，省的总低头，干咱这行的容易得颈椎呀，爱惜自己。
18. 垂直电泳时，可在电泳糟中放入青霉素小瓶等，可自然使液面提高而不影响电泳，又很节约电泳缓冲液。
19. 我们有时要沉淀东西时，由于沉淀量很少，离心完之后不知道到底有没沉淀下来东西，由于量很少，不好观察，所以离心时建议按特定的方向放置离心管，这样你就可以在离心之前确定沉淀该沉淀到管子的大致部位，这样离心后就可直接观察那有没有沉淀，避免满管子找，另外看沉淀时可以对光看，这样就是颗粒状的细小沉淀也能看见的。
20. 大家都知道PMSF有剧毒，以前都是知道浓度和要配的体积的基础上,算出要称多少毫克的PMSF,其实也可以先称PMSF,称多少算多少,再调整异丙醇的体积，到达你所要的浓度。这样就避免了你长时间和它接触。
21. 跑好SDS-PAGE胶的一些体会。
1. 清洗好玻璃板，不要偷懒，很多时候跑完电泳撬胶时会因为玻璃板不干净胶粘在板上把胶撬破。
2. 配胶时不要反复用枪混，稍微摇混就可以了，用枪混多次会导致胶凝不好影响电泳图的分辨率。
3. AP分装成500微升一管保存放-20度，避免AP用太久失效。
4. 倒胶时把玻璃板中的水用滤纸尽量吸干，因为微量的水存在会影响配的胶浓度。
5. 尽量不用过夜放室温或者四度的胶，也回影响胶 的分离效果。
6. 电泳完撬胶时根本不需要用撬胶板，在一平皿里装好水，把有胶一面的放在水中晃动几次胶很容易就脱落下来，一点没有问题，方便的很。
7. 点样时样品别忘了离心这步，因为上样含有固体沉淀会影响电泳图分辨效果。
8. 尽量在冰浴状态下跑。
22. 做 ２－ＤＥ 做的比较多，总结了几个小窍门：
１．一向电泳时，盐离子容易聚在 胶槽的两侧．剪一小段ＩＰＧ胶条放在 两侧，构成盐桥，电压就容易上去了．避免一向电泳不好影响最后实验 结果．
２． SDS－PAGE时,在灌胶之前,一般大家都会用凡士林封底, 在SDS－PAGE
电泳之前又必须把凡士林搽干净,很是麻烦,我的经验是:不用凡士林,取少量未加Ap的分离胶,按比例加2倍量的Ap,然后灌入板间,等上几分钟,待胶凝固后就可以接着灌分离胶了.方面,效果好!
23. 蛋白质纯化时，蛋白质降解可能与超声破菌保持冰浴有关，之前建议加pmsf，建议在上柱子洗脱的时候也加pmsf（蛋白降解抑制剂），一定要用之前再加。
24. 做透析的时候，拿一个5ml的枪头或者是其他类似的东西，剪短，穿过个塑料泡沫之类的面积比烧杯大东西，然后把透析带一端扎紧，另一端开口绑紧在5ml枪头下端，扎紧得那端也可以弯过来绑成u字型。这样就可以用1ml的枪穿过5ml的枪头的孔，另一只手调整透析带，来加样取样，省去了总绑透析带的麻烦，对同一个蛋白大量多次透析非常方便
25. 第一次发贴说一下自己的小经验，希望版主能给我一分，每次看到好东西因为没分都没法下，好羡慕有分的人啊。当然也不能不劳而获，说一下自己的实验技巧给大家分享。
1. 配SDS-PAGE胶时，用枪头混匀比较麻烦，而且费时费力，效果也不好。可以剪一小段夹文件的那种曲针做转子放到配胶的小烧杯里，在磁力搅拌器上边搅边加入各溶液，这样加完也就混匀了，直接灌胶即可。
2. 上面的站友也说过，上样用黄枪头就行，我也一直在用，根本不用注射器，方便的很，建议大家也试试。
3.电泳后考马斯亮蓝染色一般要1h到2h，脱色也要2h左右，麻烦的很。现在给大家说一个简单的方法，是我从一个师姐那里学到的。
加入染色液后，先放入微波炉里加热5-10秒，使染色液微热即可（千万不要加热太久，否则冰醋酸就挥发了）。然后放水平摇床上摇20分钟，最多半小时就染好了。
脱色也很简单，不用脱色液，直接用去离子水，放微波炉里煮沸5分钟左右，然后将水倒掉，再换上新的去离子水煮，这样反复几次，就可以了。效果可能比正常的脱色稍差一点点，不如那样清楚，只要电泳时比平时多上1/5的样品就可以了，关键是这样省时省材料（用不着含甲醇和冰醋酸的脱色液）。方便快捷！
放心，反复煮胶不会把胶煮坏的。
26. 我也说说我的小经验。可能大家都知道，请别笑话我。
1、配胶时一定要掌握好时间，不要因为过度赶时间，而造成以后的条带粗大，压不成条带，且消耗很多试剂和时间。
2、加样时，冲洗加样器可用双蒸水，用电泳液会使加样器中有很多的泡沫。或许是因为SDS的原因吧？
3、对于大分子蛋白质，转膜过夜更好。滤纸的张数可以适当减少。
4、在跑样时同时加入MARKER有助于正确识别所需的蛋白位置，减少NC膜的消耗。
5、一抗、二抗的浓度不要太高。
6、做ECL显影时，根据荧光的亮度调整时间。泡完显影液，胶片应用水洗一下，以减少定影液变黄。
7、和有经验的同学交流，也是非常重要的。知识的交流绝对有助于试验的成功。
这是我目前的一点拙见。
27. 推荐一个省质粒试剂盒硅胶柱与溶液的方法：
所有试剂使用手提质粒自己配置的溶液一、溶液二、溶液三（代替试剂盒的solution1、2、3），然后一比一的与饱和碘化钾或碘化钠（代替结合缓冲液）混合，就可以让质粒在硅胶上结合，而试剂盒的硅胶柱可以重复使用，没有试剂盒溶液量的限制，只要是一样的质粒我想提几管就提多少。
顺便说一句硅胶柱也可以用自己买的硅胶粉末代替，离心后倒掉硅胶柱上面的上清就可以，用起来不象柱子方便。效果比手提的要好要快。
28. 做WB时,样品比较多, 又怕放时间长了对蛋白样品不好,而且确定以后肯定要做某个抗体,只是一时没有决定.那么你可以选择先做SDS-PAGE,并转膜. 然后把PVDF膜凉干, 放四度保存. 以后拿出来封闭后,加抗体就行了. 蛋白在膜上,且已经分离, 比保存在BUFFER里面的蛋白肯定更可靠。呵呵
29. 今天作his纯化的时候，又琢磨了一个窍门，与大家分享。我得样品比较多，几百ml，而柱子不够大，只有10几ml，跑来跑去的上样，还总得记着，太麻烦了。于是，我就刷干净了一个烧杯，装了我的样品，找了一个细胶皮管，当连通器，就像鱼缸换水一样，用5ml枪在一头一吸，液体流出来，放到纯化柱里，调好烧杯的位置，两个液面一样平了，呵呵，上了好几个小时了，没有问题，现在调低速度，过夜上样：）
30. 能导致PAGE胶不凝的原因主要有三个：
1、配胶中用到的主要试剂的配置。
主要就是30％的丙稀酰胺的配置。粉末状的丙稀酰胺和甲叉丙稀酰胺使用不应该超过一年，因为丙稀酰胺会吸潮水解，这样以来丙烯酸的含量就会加大，从而导致page胶不凝。
2、温度。
温度高时凝固快，但是亦不宜过高，因为温度变化会影响交连物的孔径大小。所以温度在25度最为合适。
3、氧气。
氧气是凝固的终止剂，所以不能让胶中出现气泡。
虽然都是些看起来听低级的错误，但是不注意还是会犯。
31. 我做2维蛋白电泳，也有些心得：
1、向电泳玻璃板内加入胶条时，先在缝隙中加入配好的溴芬兰缓冲液，要加满，再将胶条贴后面玻璃板壁用薄塑料片将胶条缓缓推下至凝胶上缘，这样可以很好的避免胶条下形成空气泡。
2、能做出好的图谱已经很不容易了，如果在扫图时撕破实在可惜，所以扫图要小心，将凝胶转移到扫描仪时可以用塑料隔片在下面托着，同时保持有些水，这样就安全多了。
32. 凑个热闹说两句吧
1、sds-page胶如果配好装好倒入内槽液以后，发现内槽液稍有渗漏，可以把外槽液多加一些，加满，加到与内槽液相齐，这样就可以继续正常跑胶，不用浪费已经加进去的内槽液
2、至于染色脱色的问题，我们这里一直是染色：加热半分钟，摇20分钟；如果染液不是新配的，就加热半分钟摇十分钟，凉透了再重复一次即可
脱色也一直是用去离子水煮两三次即可
3、不知道大家都是怎么做酶切的，我的体会是，酶切质粒时，两个酶分别单酶切比直接双酶切效果要好很多。我有一次双酶切两次都没连出来，后来分步单酶切，连接效率几乎100%。
可以第一个酶切完后直接把体系热失活，（根据酶说明书上一般是65度20min）然后直接向里面补第二个酶
或者第一个切完后用氯仿抽提，把蛋白提出
或者中间做一次回收，这个就要考虑回收效率和损失的问题了，但是这样除蛋白最彻底
前两个方法我们这都是有人做过的，已经都很好用了
33. 俺也来说说关于Bradford法蛋白浓度定量和DTNB法巯基浓度定量的一点体会：
我是做蛋白修饰巯基后，通过这两种方法的定量来间接反应修饰的程度。一路摸索过来，也有半年有余；最大的体会就是不要急于求成，直接实验，首先检测修饰体系是否对方法有影响，修饰基团是否会在595nm和412nm下有特定的吸收，修饰后修饰试剂本身是否会有变化，对蛋白整体结构造成影响，其次再谈具体修饰比例和程度。对于巯基浓度测定方法，有四种（Anal Biochem. 1998 Dec 1;265(1):8-14），而DTNB本身虽然灵敏度不高，但是重复性和抗干扰是最佳的了。
34. 考马斯亮蓝染色后的脱色，如在脱色液中加数张捏成条状的Kimwipes纸（国外实验室常用，相当我们的擦镜纸，全棉纤维制造），由于染料吸附到纸纤维上，脱色加速。待纸着色较深时，更换新纸条，不用换液。我想脱脂棉或纱布也是一样的。但滤纸等可能不行，会溶掉。
半贴壁细胞如SP/0或杂交瘤细胞传代时，不用吹打或刮落。先将上清吸出，适当拍打培养瓶（当然是塑料瓶，玻璃瓶拍碎了别找我），即可见贴壁细胞脱落，加培养基混悬即可。注意，过力拍打培养瓶会裂，特别是瓶颈。
35. 一向电泳时，盐离子容易聚在 胶槽的两侧．剪一小段ＩＰＧ胶条放在两侧，构成盐桥，电压就容易上去了．避免一向电泳不好影响最后实验结果．
36. 我也推荐几条：
1、关于20021108战友的说法，我觉得我们制备好了一批感受态，最好马上转化一种已知质粒，与此同时，取一点感受态接种到含抗性的固/液体培养基培养来做对照。这样第二天即可以知道这批感受态是否还有外源质粒，又可以知道这批感受态转化效率的高低。如果合格，那以后就可以放心使用！因为我也曾经遇到其实是因为感受态不好而导致试验不成功，但是当时不知道，结果费时费力。
2、做克隆挑斑时，我们可以在将沾有菌体的牙签丢到试管前，在一块相应抗性的平板上点一下，标注清楚，培养时间稍长一点，待长成较大菌落后收取。以后需要哪一个菌,就在平板上挑取。这样既方便快捷，又可以保证菌的一致。
3、抽提质粒时，加入Sloution II和III后要求轻柔混匀。我个人觉得不用这样，只要不是非常剧烈，可以快速混匀。尤其可以运用在一次抽提多管质粒的时候，这样可以快速，而且效果一点也不差。
4、抽提质粒时，用无水乙醇沉淀的时间可以由实验操作者来决定，如果时间充裕可以30min，否则8-10min也可以。至于温度，个人觉得-20度好于常温。如果加入可醋酸钠，会较容易形成盐类杂质，所以时间短一些更好！
今天想到这些，先写到这里，以后想到了在上来与大家分享。希望我的小经验对大家有所帮助！
37. 首先声明：实验中的一些技巧要用在首先对基本的操作有深刻了解的基础上，在力求省时、省力、节约成本等的同时，实验的准确性是最重要的。
对大多数做蛋白的战友们来说，培养细胞应该是不陌生的，我这里谈一个培养细胞的小技巧，大家知道，对于一定的空间（如某种尺寸的细胞培养瓶）来说，细胞数目太多或者太少都不利于其生长，太多了就要消化，太少了要换一个小点儿的培养瓶，我的做法是：如果细胞数目太少，可以不必去找小一点儿的培养瓶，可把原来的培养瓶由原来的平放改为竖着放，这样底部的空间就小了，有利于细胞的生长，当细胞数目增加到一定程度的时候还可以在平过来，避免了来回换培养瓶而增加污染的机会（对没有小培养瓶的更实用）。
个人体会，仅供参考。
38. 说说关于SDS-PAGE的几个小经验
1、做好胶后，把所有的加样孔都加上样，这样可以防止边缘的样品脱尾。
2、高电压/高电流电泳时，可以把电泳槽放到4度冰箱中进行电泳，省时省力，1hr搞定。
3、胶考染时间40min，放在凝胶摇床上（没有胶床可以放到28度普通摇床上，但要控制好摇床速度）缓缓摇动，使染色均匀，同时可提高检测的灵敏度，根据我的经验可以达到银染的级别，就是脱色时间比较长，一般需要脱色2－3d，夏天的时候要勤换脱色液，防止变臭哦
39. 质粒小提如果是用作鉴定或酶切，不必进行酚仿抽提，将溶液1.2.3 离心后的清液移入一个新的1.5ml离心管中，再次离心3-5分钟，小心取出上清液后，直接沉淀，不必担心DNA切不开，我已经这样使用一年多，没出过什么问题。当然这样的质粒不很干净，但是做鉴定足够了。尤其是实验室女同胞们，可以减少酚仿的侵害，而且节省时间。

分子生物学当中的经验教训及技巧[copy](2009-03-23 15:02:08)

大家平时做实验，肯定都有很多小的技巧，在书上都看不到的，也没有系统的整理，但是确实能够起到很好的作用，不妨在这里与大家分享一下。
任何专业任何点滴的东西都行，也许就对别人有一点好处哦！
举个例子：
我在用酶标板加样的时候，蛋白样品常常会产生很多气泡，如果做荧光实验，由于灵敏度非常高，一点点微小的气泡都会影响很大，常常又不可能加消泡剂，我就用卫生纸，撕下来一下条，搓成小针，碰一碰气泡就破了，很好使：）
1、酶切或者PCR体系混合好以后，大家都会用手指轻弹EP管的底部来混匀溶液，常常出现很多气泡。这时候轻弹液面上方的管壁，消除气泡就轻而易举了。千万别弹液面下方的，气泡会越来越多。
2、CR不要一次做太多样品 有时候机器不稳定 影响结果
3、用卫生纸是一个，我觉得最好的是用接种针烧热了之后去戳一下，防止被卫生纸污染哈
建议瞬间离心一下是最好的，不但消除气泡，还有将管壁上的液体离下来，否则可能不够分装
4、卫生纸主要成分是纤维素，一般并不会污染样品，除非你做分析实验，之所以用卫生纸是因为它会吸水，减少水的表面张力，很容易就让气泡破裂了
5、磁珠回收时，不要贪多，收集上层即可，太过影响DNA的纯度和质量，对链接、转化有影像。
6、各种buffer都要完全融化后才能用，而且不管什么药品，如果只剩下最后一点底子了，最好放弃，因为可能会影响你的实验
7、动手前，一定要思路清晰，尽量把要做的事情列出来
8、做前一定要在笔记上写上1、2、3.....，在按照笔记一步一步做，否则容易出错。
9、要加的酶阿，dNTP，水啊之类的能分装的话最好分装好一点，万一污染的话就全完了
10、实验前,列个表单,列明关键点.避免出错.这样费一点时间是值得的.不要太相信自己的记忆.
孤风逐日：任何试剂反复冻融对其效率都有很大地影响。所以买来的试剂第一次使用时要注意按每次实验用量分装保存。提取的模板或纯化的样品也最好分装保存，以备不测。
很多个人经验在个板块相关分析中都有一些提及，只要多加留意就可以学到很多高手的不传经验。
11、同时做很多管PCR时的加样技巧
例如，需要做n管PCR：
   1. 如果用同一对引物扩不同的模板，可以先按照事先确定的比例，按照n+2的量把水，反应缓冲液，dNTP，镁盐，引物和Tag酶先加到一个大管里面，混匀后就是“预混合液”了，然后把“预混合液”分装到做PCR用的小管里面，通常我会分装n+1管，最后向前n管里面入模板，混匀，最后一管不加模板而是加入和模板等量的无菌水，作为对照，以检查加样过程中是否引入了污染，接下来就可以进行PCR反应。
   2.如果用不同的引物扩同一模板（不做多重PCR），则将第1点的引物和模板次序调换即可。
   3.同理，如果用不同的引物分别扩不同的模板，则将引物和模板留在最后分装后再分别加入。
这样做的优点：可以大量减少取样次数，减少了不同PCR管之间的误差（这一点对于荧光定量PCR尤其重要）；节省时间。
缺点：如果在制备预混合液时的任何一步引入了污染则会导致这一批次的所有PCR反应都被污染，所以我每次都做一个阴性对照（用无菌水替换模板），以检测是否被污染。
12、如果遇到试验有很多步，只是自己看protocol做，没有人带而且是第一次，我建议确立好步骤，然后每做一步的时候只注重眼前这一步，认真的做，不出错。这样每一步都只是关心眼下，可以集中精力，并且每一步都保证无误，最后结果应该不会太坏，而且即使出了问题，可以排除操作的因素。
13、跑PAGE胶染色的技巧吧：
其实是我自己的亲身体会，大家都知道如果严格按照protocol上的去做不但浪费药品，也浪费时间，程序还繁琐，当然代价也高些。
1、如果你跑的是小板的（SSR之类的分析足够），那么先找来4个1升左右的空塑料瓶，洗干净（我用的是上海国药的装尿素瓶，带盖的），用来分别装银染要用的固定液、染色液（硝酸银）、显影液、纯水，在每个上面分别写上名字，以免弄错，每次回收这些溶液后，把盖子拧紧，以阻止一些挥发或分解吧，延长使用“寿命”。
2、一般的书上都说显影液只能用一次，其实完全不至，我一般都是至少用2次，根本一点问题都没有。还有固定液和染色液也可以适当多用几次，只要能然出来就行。
3、有的时候实验室用超纯水so多，也so浪费，或是一时半会制不出来，而染色要用怎么办呢，我无意中就用蒸馏水代替，什么问题都没有，根本没啥差别，甚至于后来我压根都不用蒸馏水了，干脆改自来水，也没啥问题，完全可行，不信大家可以试试，呵呵，虽然说是可能某些地方不是很合理，但对一般像做分子标记之类的根本没啥影响，替老板能省就省点吧，大家都不容易，哈哈!
还有我忘了说了，以前经常跑完胶后来不及染色就得回寝室了，怎么办呢，不用熬夜，就把胶剥离下来泡在固定液里，第二天早上再来接着下面的步骤一点问题都没有，就是可能胶尺寸会有些变化，但绝对不影响你的结果。
最后一个就是读带问题，我见过别人好多种方法，但我自己“发明”了一种实用、准确的：
找一块大点的普通玻璃板(我当时用的是跑大垂直板胶的），带上手套（保护好自己，虽然聚合后毒性小，但还是有的），快速把胶捞出来，放在玻璃板上，再迅速把玻璃翻个面，平放在观片灯上，只要你速度快，胶是不会掉下来的，会紧紧贴在玻璃上的，最好玻璃板和管片灯的平面有点空隙，否则胶粘住观片灯表面就会把灯面弄脏，胶也可能会掉，一切弄好后，你就可以直接那笔在玻璃的这个干净面上一清二楚的读带，直接可以往上面写带型，然后为了以后检查用，最好用数码相机快速拍照保存，不但胶上的带可以看清，你在玻璃上写的带型数字也是非常清楚的，当然读完的胶就可以立即扔掉，没必要保存
14、做实验时，认真做好记录，写好实验结果，过一段时间再去看看，温故而知新
15、有些时候做完ＰＣＲ，由于条带很淡，但你想回收．不妨将有目的条带的胶切下来．放到－２０度冻一会，拿出吸它的液体作摸板，再扩增效果很好！！
16、做转染，我养过四五种细胞，都做了转染，但每种的转染率都不一样，本人当时就吃了这个亏，提醒大家，谁做转染事前先查一下要转的细胞转然率怎么样。
还有就是我在用脂质体2000做转染时，一次发现转染6小时后的液体打到其他细胞里仍可以转进去，所以为了提高转染率，我以后在6小时的时候都没有把转染液体打出去，只是又加了含血清的培养基。
  但有一个问题就是，不打出去的话，细胞会死很多，这个也与养的细胞种类，状态都有关。
17 PCR预混:预混一般根据样品的多少，一般我在预混的时候大概每个样品管中预计损失0。5－0。6微升，这样计算需要的总的预混液数量，比较合适。
18、做实验前  一定先写出步骤和列出实验所需要的试剂和器材，下面看看哪些是要购买的，哪些是需要清洗的，哪些是要前处理的如过滤、高压。
定试剂一定要打提前量，不好买的试剂一定要在3周左右前订购，如在SIGMA订货。
实验的时候一定要坐好标记！！什么时间，多少浓度，如PH值,是否过滤了，
做完实验有写离心或过滤的残液，先不要丢弃，万一实验失败，还要重复的。
实验中的每个环节都很重要
忽略任何一个都可能导致实验的失败
每个人在实验中都有自己的一些好的细小的习惯
例如tip头吸完后马上从移液器上取下来，以免忙乱的时候又以同一tip汲取另一种试剂
用完量桶或者烧杯后，及时清洗，并放入烘箱。
不管大小实验，做完后都要认真做记录。
一个枪头如果可以连续吸两次的话，也不能吸，主要是第二次吸时不准，同时也不能完全打出来。
做完实验擦干桌子，一切东西归位，有些东西可以回收的就回收，很多实验室的枪头是回收的
实验前认真设计，作实验时不胡思乱想，叽叽喳喳，做完后在海阔天空，认真分析试验数据
做之前认真设计,做时就不要老是想着结果,平心静气,注意细节，认真记录，因为失败是常事，不要回过头不知道该从哪里找原因。
每次的实验结束，要及时做好记录，不要等。好记性不如烂笔头，这虽然是俗语，但是不要放弃笔的重要性！
加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均
做完实验，清理实验台，以便下次能够更快、更好，更方便的继续工作！药品归位，仪器归位！
做实验一定要有计划,最好在有部分实验数据出来时,就着手写文章,这个不是为了出文章,而是在写文章的时候,可以清晰自己的思路,知道后面该先做什么,该重点做什么.不然有时候辛苦半死,数据太分散,不能说明问题.
不轻易用别人的东西，用时先打招呼，记录要详细，配液体时要记录试剂的批号等?
所有的东西都要即时标记好，日期，药品名称，浓度，等
移液枪用完之后要归到最大计量的位置，防止久而久之弹簧失去弹性。
不用酶标枪时不要一直拿在手里，不可以倒过来（特别是里面还有液体的时候）
不要一直说话、聊天~~
笔记要全~要多全有多全~
还有一点很关键，笔记要放好，最近我的笔记掉了~哭死
最后，做完实验要洗手~
离开实验室前或进入实验室前注意水，电是否安全
试验之前看资料的时候，最好规类存放，看过后记下重点内容，并将出处标明，以免日后找不到
一定要记着关水浴箱，切记切记。

转自小木虫~

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这里我想与各位虫友分享一下我个人在CV写作上的经验与心得，这里用了一个比较醒目的标题“创作与包装”，之所以这么写，只是想一改传统CV写作的枯燥与陈腐，给大家带来一股清新的写作风格。当然，这个说起来容易，却不容易做到。这里，我将会毫无保留地与大家交流下我个人的想法与体会。

首先，根据我个人的感觉，CV比PS重要！不仅更重要，而且是首要的。

对于绝大多数教授而言，首先入目的都一定是你的CV，而绝不是PS。我为什么这么说呢？因为我告诉你我在什么情况才下会出示PS，那一定是教授看过我的CV后对我表示了一定兴趣的情况下，也就是说很多教授甚至在没有看过你的PS之前都会对你表示兴趣。注意，这种兴趣在某种程度上表示着一种承诺，如果再有类似于说帮助你争取奖学金之类的话，那么，它就是一种承诺，绝对是动真格的。只要他不是说让你自己去找奖学金（当然CSC也可以，如果你满足条件的话），恭喜你，你已经拿到了至少半个Offer。另外一个证据是，我很少发现哪个教授会对我的PS进行评论，而评论大多来自于CV里的内容。

然后，我想说说我为什么用包装这个字眼，看似像是个贬义词。其实，包装这里并不是贬义的，因为包装不等于造假。造假是绝不允许的，你在简历里面写的所有内容，每一个关键数据，都必须保证其真实性。我说的保证，不是说你用自己的人格来担保就可以了，而是要能够提供书面证明或其他有信誉度的担保人的。教授可能随时会就你在简历里面陈述的内容进行核查的。这里我可不是吓唬你，前几天我告诉一个教授我拿到了一个法国的Offer，他直接给我回复：“I knew it. Prof. *** ever contacted me to know more about you”. 看完就出了一身冷汗，够狠，幸好我没说什么过分的话。所以，我可不是教大家如何造假的，这里我讲的是包装，即适当的“引导”是允许的，适当的“水分”也被认为是可以接受的。但这要看你说的话够不够tricky，够不够mellow。关于如何才算是好的包装，我将在具体事例中提到。

简单的说，一份好的CV，应该是那种让教授看完后就立刻有见你本人的冲动，想更多地了解你。而接下来，他可能就会向你索要PS及一些能够佐证你CV的材料，如成绩单等。这里，你必须将你的CV与PS进行很好的区分。我的感觉是，CV是在陈述事实，而PS是在对事实进行解释与引申；CV是客观存在，PS是主观能动；CV是人生经历，PS是心得感悟。所以，CV与PS之间应该是可以相互说明的。

好，进入主题，按我的CV模板一条一条来谈。

1. 标题 CURRICULUM VITAE  (or CURRICULUM)

2. 个人信息  PROFILE

需要把自己的名字放在醒目的位置，加粗加大。重要的信息是：出生日期，国籍（都可以影响到奖学金的申请），及联系方式。
应该附上你的个人形象照，以增加教授对你的感性认识！

3. 教育经历 EDUCATION

先写研究生期间的，再写本科。
研究生期间的，需要写明你毕业论文的题目及指导导师（头衔与职位）
成绩与排名，非常重要的信息，但并不是必须提供的。比如说，你自己感觉成绩与排名都不是很好的话，建议不要出现在CV中，以避免因此项而被直接Pass掉。如果教授在意的话，他会后头儿问你的，那时再告诉他你的成绩与排名，并给出一个让他能够接受的解释，只要你说的有道理，他是会考虑的！！我就没有写我的本科成绩与排名，一个教授就根本没问过，还有一个在申请材料中必须提供，我就写了，教授也啥也没说。更有意思的是，后来我做Presentation的PPT时，我写上了本科排名，教授说你的演讲时间有限，应该删去这条无用信息！So, Tricky!

4. 工作经历 WORK EXPERIENCE

如果有的话，请写上。工作职务，什么单位，工作内容是什么。务必精简。

5. 个人技巧 PERSONAL SKILLS

会什么语言，软件，以后在科研中能够用到的；也可以是对什么设备非常熟悉；还有就是外语水平了，有没有考过雅思托福什么的。不管写什么，你得确信教授对你写的东西了解，并认为这对以后的科研是很重要的。别写一些老外压根儿就不知道的东西，或者与你以后科研完全没关系的。

还有，可以用proficient, command, familiar 区分开你对这种技巧的熟练程度，不要都用skilled in，你这么说，人家未必相信。

6. 奖励 AWARDS

从本科算起的奖学金都可以写上去，但不要逐条写出来，因为那样会变得冗长而无效率，可能还会给人一种感觉，原来这个奖学金这么频繁，那样就不值钱了啊！所以，同一类的奖学金就一次概括好了。

为了显示这个奖的价值，后面最好加上小括号，注明你是在多少人中获得该奖的，to show competitive and uncommon, 如 (only 5 of 300 students in department of *** awarded)。这里其实是可以有文章做的，比如我拿的一个奖，是全校的，但主要是面对某些工科生的，获奖的多数是博士生，那看看我怎么表达的 (ONLY TWO master students awarded in the Graduate School of University of ***) 所以，Be tricky!

但不要自己吹嘘这个奖多么牛，这个话还是让别人帮你讲出来最好，比如你的推荐人，如果他们了解这个奖的话。

7.  科研兴趣 RESEARCH INTERESTS

这个嘛，可不是让你天马行空，空穴来风地瞎扯淡的。
一个是要与自己的科研经历相符合，另一个呢，强烈建议参考你申请导师的科研兴趣。但你不能Copy他的，你可以按他的兴趣来写，却用自己的言语进行表达，并尽可能与你以前的经历相吻合，让人家觉得 reasonable！

8. 合作经历 CO-OP ACTIVITIES

不是每个人都有，有的话就写。比如你参加过国际、国内会议；与外国教授有过合作或者交流经历；是否有过做交换生的国外经历；自己有没有什么特别的社会活动经历。

我的一个卖点就是我工作后的项目是与前导师合作进行的，当然项目不是我运作的，我只是个干活的，哈。我是这么写的Keep a close connection with my former advisor Prof.** on research projects, e.g. *** funded by the company. 这至少说明你人品还行，能毕业后继续与导师合作的案例，肯定会得到你未来导师的尊重！
还有一些，可以渲染一下，如 International academic exchange experience (face-to-face and via email) with some well-known professors in my research filed, e.g. Prof. *** (University of Wisconsin-Madison)

9. 项目经历 PROJECT EXPERIENCES

这个是重头戏！重点介绍下你硕士期间做的项目，最好与未来的研究课题相关。不是很相关也没问题，起码可以用于证明你有做科研项目的经验与能力。

写上项目的标题，起止时间，及指导老师与合作者，然后在下面用3行左右的文字来进行一个brief description，一定要精炼。我一般就写根据***，提出****，实现***。一句话OK，里面多套定语从句。

10. 作品列表 PUBLICATIONS & PROCEEDINGS

publications是指发表在期刊上的，proceedings是指会议论文集。即便没有发表的，也要列上去，写上状态，如接收(accepted), 审稿中(under review), 投稿(submitted)。这样写是没问题的，老外也喜欢这么写。没有论文集的会议，也可以写上啊。

需要注意的是，中文论文一定要在文章标题后面加上IN CHINESE, 我都是这么大写的。不要尝试在这一点上误导教授，这可不是可以tricky的地方，一定要说的明明白白的。还有就是，将自己的名字加醒目字体，并带下划线。

不要对你发表的期刊的档次进行评论与描述。首先，英文的没必要，描述了，好像教授还没你懂得多；中文的呢，也不能王婆卖瓜，自卖自夸，因为信息是不对称的，自己描述并不合适。但你可以在推荐信中，借你导师之口进行一下描述，比如我导师在推荐信中有这么描述的：At the time of his graduate, he already had several papers published in national core journals and international conference proceedings. One of these papers was published in ****, which is one of the most influential scientific journals in China.

因为从读研到工作，先后参与到了不同方向的研究课题，与不同的人群进行了合作，这使得我的论文颇具高产、合作者众多的特征，质量也参差不齐，从SCI期刊到省级刊物都有。我感觉，教授，尤其年轻教授，都会偏爱于高产型的学生。因为人们判断你未来在某方面是否可以成功，往往根据你过往在该方面的表现。至少我半页多的论文列表着实会吸引一些教授的眼球，甚至于一位教授就这么露骨地对我说：I expect to work with you on creating international papers in the next few years. 看到后，很无语，看来不只是中国人要造论文的啊。

这里，我想强调一点，在你的CV中，最重要的信息有两条，即成绩排名与论文，尤其是后者，甚至被认为是申请的王道！如果既没有论文，成绩排名又不高怎么办呢？这种情况下，你就需要把宝都押在推荐信上，在CV中多加一个项目“recommendations” or "recommenders"。写下你推荐人的信息与联系方式，根据我听到的不少案例，一个强有力的推荐人足以帮你实现大逆转。

我认为，CV应该控制在两页以内，因为教授的时间是很珍贵的！内容应该尽量精炼，条理清晰。在行文方面吧，我感觉还是华丽点好，给对方点视觉冲击感，但也不要很夸张的那种。多参照一下别人的CV，特别是欧美人写的，这个Google上一搜一大堆，选取合适的词语与句式来点缀你的CV！他山之石，可以攻玉！

最后，不得不再次强调一点：永远不要自作聪明，永远记住看你简历的人，其智商都远比你高。 Be SIMPLE!!! Just tell them the FACT, NEVER try to judge yourself or teach the professors something that should be done by the professors, not YOU.

  推荐给实验室青菜们~

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                      主要审稿进程解释

当前进程进程内容下一阶段可能的进程 收稿 对符合本刊发表要求的网上来稿予以接收，并给作者回执告知稿号  待交审稿费，退稿  待交审稿费  接收审稿费  执行主编初审，退稿  执行主编初审 对稿件初审后将稿件分给各学科编辑  学科编辑初审  学科编辑初审  对稿件进行全面初审，若稿件符合要求，则提供3个以上审稿专家。  常务副主编初审  常务副主编初审  对稿件和学科编辑的初审意见进行审查，若稿件符合要求，选择审稿专家，或将稿件交给副主任初审。副主任初审，学科编辑初审，学科编辑送审  副主任初审  对稿件和学科编辑的初审意见进行审查，并选择审稿专家，若稿件符合要求，则选择审稿专家。 学科编辑送审，学科编辑初审  学科编辑送审  将稿件送给编辑部最终选定的审稿专家 外审，退稿  外审 审稿人在审稿中，至少需要两个外审  执行主编终审，学科编辑初审，外审  执行主编终审  对外审意见进行汇总，对稿件是否采用提出意见 常务副主编终审  常务副主编终审  对外审意见执行主编终审的意见进行汇总，对稿件是否采用提出最终的意见。 编辑加工  编辑加工  针对稿件的最终意见对稿件作出处理，或对直接采用或作者修回的稿件进行审查。 退修，退稿，外审，英文审查  退修  对编辑部要求作者修改的稿件提供修改意见，并发送作者修改 编辑加工  英文审查  对已采用的稿进行英文内容的审查 待排版  待排版  提交编辑完成的稿件，并提出排版要求  排版  排版  对编辑完成的稿件进行排版 待交版面费  待交版面费  通知作者交版面费，并校对清样  定稿，退稿  定稿  对要刊用的稿件的整个处理过程进行审查 定稿审查  定稿审查  再次对要刊用的稿件的整个处理过程进行审查 待发稿，编辑加工  待发稿  进行一校、二校、三校  发稿  发稿  将最终清样列入发稿库，等待发表  组版  组版  稿件正式出版，有确定的期次、页码  

  作者：王孝养

据百度百科介绍，“时髦，古代指一时的英才。现指短暂的时尚。时髦是非理智的与过流性的行为模式或行为模式的流传现象。以持续的时间讲，时髦现象处于风格与时尚之间”。（http://baike.baidu.com/view/115548.htm#sub115548）
  各行各业都有时髦,拿穿着打扮来说，文革期间穿军装很时髦，文革后期穿喇叭裤时髦，后来又流行牛仔裤，再后来…。
  科研的时髦是什么？我的理解是，科研的时髦就是当今科研究领域最新流行的被许多科研人推崇的新观念、新技术、新方法。别的专业领域我是外行，以生物医学领域为例，干细胞研究应该是最时髦的，2010年有关干细胞的论文发表多达18910篇，估计参与干细胞研究的全球科学家多达十来万。其次是表观遗传学研究（在无细胞核DNA序列改变的情況时，基因功能的可逆的、可遗传的改变，如DNA的甲基化修饰、组蛋白的各种修饰等）。再次，是新一代高通量DNA测序技术。
  有些科研之所以能成为时髦的领域一定有其过人之处，比如该研究意义重大，或该技术有很高的应用价值，再加上科学界领袖们的大力推介，很快在科学界流行起来。
  作为科研人，科研的时髦该不该去赶？这个问题值得深思。首先来看看赶时髦的好处：1）容易找到更多的参考资料，由于时髦的领域从事的人较多，发表的论文也较多，容易找到一些较新的资料。2）论文容易发表在影响因子（IF）较高的杂志。大多数高IF的杂志都要求论文有较广泛的读者群，只有时髦的领域的论文读者群才会多。3）时髦的领域的论文发表后被引用的机会更多。4）对于许多以IF为评价标准的单位科研人员来说，时髦的领域的科研会给个人带来更多的实惠和利益，包括奖金、职称晋升和科研经费的获取。
   赶科研时髦的坏处：1）竞争激烈：做的人多自然竞争就会激烈，甚至有同样的课题若干个实验室同时在做的情况。在这种情况下，动作慢、科研效率低和产量低的实验室会很吃亏，因为自己刚做出的东西，可能别人已经抢先发表了；2）难有重大原创：在一种科研领域成为时髦的时候，应该做了一段时间了，许多重大原创可能已经产生了。这时候进入该领域，多数只能是跟踪性或重复性研究。
   从科研时髦的角度来看，我认为科学家的才能分为五个档次：第一档次是天才：在科学界天才引领时髦，这样的人才极少，他的研究能让一群科学家们跟进研究，从而开创一个时髦热门的研究领域，比如PCR 技术的发明者。第二档次是人才：人才在自己原有基础上结合时髦科研，让自己原有的科研更加深入；第三档次是迂才：迂腐之才完全不理会时髦科研；第四档次是蠢才：蠢才乱赶时髦。这样的科研人还是有一些，今天看到这个课题时髦就玩一下，过段时间另外一个课题时髦又来做一个，结果没有一个课题能做的很深入。
   作为科研人，该不该赶科研的时髦，我认为应该根据自己的实际情况权衡一下利弊再做决定，完全不理会当今的时髦科研是不可取的，胡乱的赶科研时髦更是使不得。引领科研时髦的天才毕竟是少之又少。对大多数科研人来说，坚守自己的阵地，同时根据情况引进时髦的科研技术和理念，让自己的科研课题更加深入，并具有连贯性，只有这样才不会使自己坚守的阵地丢失。

转自果壳。

楼主不久后就要做分子诶，今晚看到这样的文章莫非是暗示楼主要去创业一番？

hiahiahia~~~~~

PS：果壳，由一次淋浴而诞生的品牌。

三星以前是卖水果的，诺基亚最早是造纸起家，世界上多少大品牌，身世多崎岖。但它们终有一共同点，即一定是由小做起。其中尤以我们今天要讲的这些品牌为甚——它们只从一个分子起家。

1947年，瑞士的医药公司Hoffman-LaRoche推出了一个由“泛醇”（Panthenol）分子衍生命名的品牌：Pantene——也就是至今仍活跃在市场上、年逾半百的洗发护发品牌“潘婷”。这个名字可不是创立者当年一拍脑袋想出来的，而是来自当时最热门的科学话题之一，“泛酸”，也就是泛醇在人体内转化成的活跃形式。

让我们回到1919年，美国的生物化学家罗杰•J•威廉姆斯（Roger J. Williams）还在他的实验室里玩三角瓶。他刚刚注意到动植物中广泛存在着一个小分子 [1] 。但是，他既未能分离提纯这个分子，也不完全了解它的作用，甚至尚未给它取过像样的名字。威廉姆斯的第一篇文献一发表，许多研究组跟风而上，纷纷投入相关研究 [2] 。14年后，威廉姆斯终于从动物肝脏中分离出了这个分子，并给了它一个名字——“Pantothenic Acid”，源自希腊语，意为“随处可见的酸”，即“泛酸” [3] ，也就是后来人们所熟知的“维生素B5”。（而“泛醇”，就是泛酸的前体，又称维生素原B5）

当时，泛酸的相关研究虽说热闹，但仅仅局限在实验室里。这样的状况持续到1940年，泛酸才被成功地人工合成为[4] 。“能够人工合成”对一个化合物来说，不仅意味着相关的研究将更容易进行，而且还预示着它离投入工业化生产已经更近一步，即将可以进入市场，满足人们的所需。

不久，D•W•伍利（D. W. Woolley）报道了泛酸与小白鼠抗脱毛相关的研究成果 [5] 。工业界终于等到了属于他们的机会，护肤、护发等个人护理相关行业开始迅速研发新产品，在其中添加泛酸。“潘婷”就是在这样的背景下诞生的。在此后的几十年里，轰轰烈烈地展开了它作为一个“小分子”的品牌传奇故事。

无独有偶，由一个分子而成就的品牌远不止潘婷一个。

瑞士罗氏公司（Roche Group），至今仍是制药行业的巨头之一。它创建于1896年，但辉煌则始于20世纪40年代初。当时，维生素C刚刚被成功合成，各大公司均欲率先实现维生素C的工业化生产，竞争非常激烈。1934年，罗氏公司抢先购得了瑞士化学家撒迪厄斯•赖希史泰因（Tadeus Reichstein）合成法的专利权，从此独霸了维生素C市场几十年，成为此役的最大赢家。在其后50余年中，该合成法一直是工业生产维生素C的主要方法。

当然，由一个分子而开始书写一个品牌、一家公司的旷世传奇，这样的例子并不只发生在化工行业。整个半导体行业的发扬光大都有赖一个小分子——硅。而在硅上位之前，在晶体管被发明的初期，人们使用的其实是锗。它大大限制了晶体管的应用：锗管的穿透电流（一个理论上不希望出现的电流）很大，且随温度的变化而变化，这对锗晶体管的稳定工作极为不利。而将晶体管这个发明真正广泛应用从而开创了整个半导体行业的，正是一个用硅取代锗来制造晶体管的发明。

小分子成就大公司的故事还有很多：

1、埃肯碳素（Elkem）：铝

2、辉瑞（Pfizer）：柠檬酸、青霉素、西地那非

3、葛兰素史克（GlaxoSmithKline）：沙丁胺醇、阿莫西林、西米替丁

4、杜邦（DuPont）：硝酸钠

5、巴斯夫（Baden Aniline and Soda Factory）：茜素

6、戈尔（W.L. Gore & Associates, Inc.）：聚四氟乙烯

7、戴比尔斯（De Beers）：碳

无责任转载。

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“Idea”这一简单的英文单词，却似乎很难用一个对应的中文词来翻译，它应该包括了“想法”、“思路”、“点子”等多种意思，所以这个看似简单的单词代表的是相对复杂的意思，更代表了对于科研人员而言非常重要的问题：怎样获得好的idea?

不少人，尤其是刚从事科研的研究生认为，撰写论文是在试验做完之后的事情，事实上，在做试验开始之前就已经开始了，即：怎么想到一个有创新性的idea是论文写作（本文只限于SCI英文论文的讨论）的第一步。年轻的父母们都不希望自己的孩子输在起跑线上，而新的idea就是科研活动的起跑线，它是研究人员拿到经费资助、最后发好文章的基础和重要基石，而idea的创新程度直接决定了以后文章的质量。所以我们即使只是为了自己前途（实际上在当今中国也是“钱”途）计，也不能使自己输在起跑线上。

“磨刀不误砍柴工”，多花几个星期想idea，看似浪费时间，由于生物医学研究的长周期性及高成本，这方面的时间投资绝对是值得的、划算的。这也有点像写议论文的论点，强调的是立意要新、要高，总是陈词滥调，不会有人感兴趣。怎么才算是好的idea呢？科学网知名博主鲁白（现任中国葛兰素史克研发部副总裁）对此有高见，我就不再一一赘述，有兴趣的朋友可以参见他在科学网自己博客上的演讲稿，题目为：“如何在顶级科学杂志上发表论文”。再来看什么是不好的idea，套用鲁白先生对不好的研究工作的评述，分述如下，谈谈自己的粗浅认识：

第一类称为Horizontal growth，所谓横向长。比如有人在某乳腺癌细胞系做出一个新的结果，我现在手头有肝癌细胞系，用类似的方法和思路试试如何？这类的思路，显然没有什么创新性，但是这类似的思路，个人认为也并非完全不可取，比如最近有人在肿瘤学的著名期刊Cancer Research发文报道过量服用鱼油可使老鼠（记不得是小鼠还是大鼠了）增加得结肠癌的风险，但是类似的工作在人身上就从来没有人做过（不一定要给给人大剂量服用鱼油），这样的思路仍然很有意义，也很有希望发表很好的论文，所以做临床的医生多和搞基础的合作、交流，多看基础类的相关论文，就比较容易产生此类的新的科研思路。

第二类为Filling gaps。这种思路在细胞信号传导研究中尤为常见，比如有人已经报道A蛋白是B蛋白的上游蛋白，另外有人报道B蛋白是C蛋白的上游，但是A和C蛋白之间的关系就是个gap，无人报道，所以我就研究A和C的关系，这种结果一般都是可以预测的，创新性不大，尽管如此，这类的发现也照样可以发表文章，只是不大可能入CNS（Cell, Nature, Science）之类的牛刊的法眼。

第三：Working out details，比如著名期刊Cell在2010年曾报道了标题为“GPR120 is an omega-3 fatty acid receptor mediating potent anti-inflammatory and insulin-sensitizing effects”的牛文。虽然欧米伽-3脂肪酸(鱼油的主要活性成分）已经研究了很久了，但是这篇文章是一个里程碑式的突破，发现了欧米伽-3的受体GPR120。但是两者作用的很多细节上不清楚，比如哪些是GPR120作为欧米伽-3的受体关键位点？两者在体外作用的动力学研究等等， 事实上，这类的思路在我们国家（甚至整个世界）的研究中占了很大的比例，我们美其名曰跟踪世界前沿，这样的思路/idea尽管一般不能出第一流的成果，但是也能发二三流的文章，对于研究生而言，这已经是不错的结果了。顺便提一下，我最近恰好听了该文的通讯作者的一个学术报告，从其得知，只有野生的鱼里才富含欧米伽-3脂肪酸，而人工养殖的鱼里含量极少，并且对人体不好的一种脂肪酸(即：欧米伽-6脂肪酸)含量在养殖的鱼里反而很高，所以说：不但“家花没有野花香”，连“家鱼”也没有“野鱼”香啊！

第四，Support existing idea, “me too”。比如钟南山院士在Lancet上报道某种治疗A病的的常见廉价药可以治疗B病（不敢确保他们的具体研究内容），所以我就用这个药的类似物，或者有类似药效的药，看是否也有类似的结果。

第五，Follow up，有人在前面已经发表了，我在后面跟上。这个有点像第三点Working out details，不再赘述。

第六，Incomplete study, preliminary。这种例子在低端期刊比较多，我在帮别人改稿时常看到这类的问题，就是说，一个故事还没有讲完呢就嘎然而止啦，让人很上火，比如有人发现某种激酶在放射辐照的肿瘤细胞中表达水平升高（mRNA和蛋白水平），就完啦，至于机理等一概没有，像这种文章，审稿人要么直接拒稿，要么就是要求补很多实验。

那么到底如何才能获得新的有创意的idea呢？新的idea绝不是闭门造车得到的，尤其是对于一个刚从事科研工作的研究生而言，更不要奢望某天会突然来灵感了，新的idea自己就会从脑海里蹦出来，连牛顿这样的千年不遇的牛人都需要站在巨人的肩膀上，何况你我等凡夫俗子？！更有必要往巨人身上靠，作为一个新手，如何识别业内的巨人或者牛人呢？个人觉得可同时利用ISI Web of Science 采用三种措施：１）结合本实验室，或本科室的研究方向现查一下该领域的被引用次数最高的几篇综述类文章，这类文章一般是必读的经典论文；２）再查该方向的发表的综述类影响因子最高的几篇论文；３）仔细阅读前面查到的一些论文，应该能判断出谁是该领域的领军人物，也就是牛人，找到本领域的为数极少的几位牛人很重要，因为这直接决定了我们要站在谁的肩膀上，接下来，再查这些极个别的牛人的近几年的论著(article, not review，当然自己实验室的近几年的文章也要仔细看)，仔细阅读，在此阶段，没有必要看的太细，比如材料和方法就可直接跳过，重点看人家提出什么问题或者是什么猜想(hypothesis)，然后采用什么技术手段和方法解决这些问题或检验这些猜想的，这部分是属于借鉴牛人的研究思路，另外更重要的是，看看牛人们都已经解决了什么问题，还有什么问题没有解决，结合自己实验室、科室的具体条件提出自己的新的切实可行的idea，想到后，趁热打铁，立刻写下来，并立马写下如何证明自己的idea，需要做哪些实验？先用Powerpoint 或者Word列出一个大纲来,和老板或同事、实验室其他人员等讨论创新性、可行性，需要补充那些实验？哪些实验是最先需要做的？这样经过几个来回，学生自己对课题就会了然于胸，也会有更大的热情和兴趣做好实验。事实上，上述大纲某种程度上就是以后写论文的蓝本。

对于想出新的idea, 我个人的一个重要体会, 简单的说就是：认牛人、看牛文！经过多年历练，运气好＋个人努力，你也一样可以成为牛人，让以后的新手们站在你的肩膀上。